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基因组时代遗传性银河线上游戏网站障碍的调查

发布了 澳大利亚/新西兰,临床评论文章 on 19th Aug 2020

Roula ghaoui.Roula ghaoui.,Fracp,博士学位,是澳大利亚皇家阿德莱德医院的成年神经科医生,亚特征患有神经银河线上游戏网站和神经发生障碍。在2012年在悉尼皇家北岸医院完成了神经银河线上游戏网站和神经生理学奖学金后,她在西部的儿童医院和悉尼大学在悉尼的神经源性和神经银河线上游戏网站障碍中完成了博士学位,并通过悉尼大学。Ghaoui博士的主要研究兴趣包括使用下一代测序以在先前未确诊的家族中使用肌病和肢体肌营养营养不良和治疗银河线上游戏网站疾病的遗传诊断。她是MITO基金会科学和医疗咨询小组的南澳大利亚成员。她也是工作组和澳大利亚基因组学卫生联盟(AGHA)项目的神经银河线上游戏网站障碍旗舰旗帜的一部分,该项目侧重于研究单一基因检测的诊断产量作为护理标准,有针对性的面板分析和全基因组和RNA测序。最近颁发了早期职业研究奖学金,使她能够检查RNA测序作为携带遗传性肌病或肢体银河线上游戏网站肌营养不良(LGMD)的互补诊断工具,尽管下一代仍未确诊。测序(NGS)。

Merrilee Createrham.Merrilee Createrham.,Fracp博士学位,是目前神经内科的基础椅,是菲奥达斯坦利医院,默多克大学和巴黎圣母院澳大利亚的联合职位。她是2015 - 2019年Fiona Stanley医院的神经学单位头部,是目前在西澳大利亚彼得罗学院的神经银河线上游戏网站和肌炎研究主管。她是菲奥达斯坦利医院和Fremantle医院的顾问神经科医生,除了作为南城卫生服务研究总监。李约瑟教授对帮助患有神经银河线上游戏网站疾病的人们具有激情,以特定的兴趣含有含有肌肤炎(IBM)。提供最佳护理的重要组成部分是与她的患者合作,在研究方案中更好地了解他们的疾病,识别治疗目标,并促进参与临床试验。她建立了翻译和实验研究计划,诊断和管理患者随着时间的推移以及生物人物。实验室计划正在进行免疫学研究,以更好地了解免疫系统在IBM和其他形式的肌炎中的作用,炎症如何链接到银河线上游戏网站的最终退化和鉴定新的治疗目标。该计划现在支持全日制免疫医生和临床研究经理,目前正在举办三名荣誉学生和两个博士候选人。

对应于:Roula Ghaoui博士,神经内科,阿德莱德皇家医院,南澳大利亚。 E: [email protected]
利益冲突陈述:没有声明。
来源和同行评审:提交和外部审核。
首先提交日期:21/1/20
同行评审后提交的日期:19/4/20
接受日期:21/4/20
引用:Ghaoui R,Centerham M,ACNR 2020; 19(3):17-20
在线发布:  19/8/2020

在创造性的公共场合发表 执照
//doi.org/10.47795/AYYZ8676


抽象的

确定遗传肌病的遗传基础是准确引导患者护理的最重要步骤。及时准确的诊断对于神经银河线上游戏网站疾病及其家庭的患者至关重要。基因组学的进步正在转化我们诊断和治疗许多遗传疾病的方式,它们对临床实践的融合降低了肢体腰带肌营养不良和肌病患者的诊断奥德赛。本综述提出了一种新的侵入性诊断算法,将下一代测序(NGS)掺入神经银河线上游戏网站诊所,保留银河线上游戏网站活组织检查,为“难以诊断”患者。我们讨论了准确的历史服用和详细表型的重要性,其次是初始筛查调查和排除常见的神经银河线上游戏网站障碍。一旦获得了足够的临床和筛选信息,NG将被认为是合适的下一步,鉴于较低的成本和变体数据与全部外壳和全部基因组测序相比,靶心神经银河线上游戏网站面板通常受到青睐。使用这种诊断范式将使更多患者能够实现准确和及时的诊断,获得适当的疾病特定的治疗,并获得知情计划生育。


介绍

许多患有肢体银河线上游戏网站营养不良患者和遗传肌病常常仍未诊断,或者由于这些疾病的表型异质性而长时间误导。传统的诊断途径依赖于在进行银河线上游戏网站活检之前进行的临床评估和多种研究的逐步过程。对银河线上游戏网站活检的组织学和生化评估仍然是诊断肌营养不良和肌病的历史“金标准”。 1,2 基于银河线上游戏网站活检发现和临床表型,随后将进行候选基因的Sanger测序,通常一次进行一种基因。缺乏明确的基因型 - 表型相关性意味着通常需要测序的许多基因以鉴定致病基因和病原变体。 Sanger测序大量单独的基因是耗时,艰苦,昂贵的昂贵。此外,由于其尺寸和复杂性,通常具有363个外显子的三肽(TTN)等大基因并不完全测序。因此,在下一代测序(NGS)出现之前仅报告几种TTN突变。3

使用这种传统的顺序途径,肢体腰带肌营养不良的诊断率仍然低于审查大型澳大利亚肢体银河线上游戏网站营养不良(LGMD)队列的审查,其中65%的家庭在没有遗传诊断的情况下,尽管有很多专家神经银河线上游戏网站中心的调查。4

ngs. 技术将NGS技术融入神经银河线上游戏网站障碍诊断的临床实践:益处和持续挑战

向临床实践实施NGS转化了我们如何调查和提供对肌病和银河线上游戏网站营养不良患者的医疗保健。 NGS也称为大规模平行测序,同时能够同时对大量基因进行大量基因进行高量的DNA测序。可提供三种DNA测序技术方法;神经源性脱蛋白超级粘合(NSE),也称为靶向神经银河线上游戏网站面板,整个外壳测序(WES)和全基因组测序(WGS)。5,6

ngs已被证明是有效的4,7,8 并且也具有成本效益。9 NGS还促进了新型疾病基因的发现10 并使我们扩大已知疾病基因的表型。11-13 在以前广泛调查的澳大利亚LGMD患者中,使用NSE或WES的使用使得能够在45%的家庭中实现诊断。其他研究表明了肢体肌营养不良,肌病和先天性肌病的类似诊断率。7,14 对于WES仅在案件中仅包括40%的诊断,将家庭成员或“TRIOS”含有更好的诊断率为60%。4 包含'TRIOS'允许基于疾病的家族偏析过滤和分层鉴定的变体。此外,包括家族成员突出显示可能已被解释为不太可能的候选人或者在用初始生物信息学分析产生大量数据时被解释的变体。4

尽管我们努力提高神经银河线上游戏网站患者使用NGS技术的诊断产量,但成人营药和肌病的诊断率仍未低于50%。4 这部分是由于与使用NGS技术有关的挑战和限制,我们需要在利用这项技术时需要了解。

ngs的局限性

常见的神经银河线上游戏网站障碍被NGS错过了

并非所有编码区都很好地覆盖了NGS平台,可能在这些区域中缺少变体。平均整体10%的整体缺乏所需的20倍覆盖范围或读取。这可以发生在具有高GC含量高的基因组区域中的重复区域,例如铁蛋白(TTN)和雁蛋白(NEB),15-17 在启动子区域和5'未转换的区域(5'UTR)区域,这些区域也覆盖着靶向捕获和WES。18

标准NGS技术,如有针对性的面板和WES,不会检测到从重复扩展产生的障碍。目前通过基于聚合酶链反应的测定进行重复膨胀的检测19 或者对于大膨胀和重复序列的南部印迹,例如D4Z4在患者中肌营养不良症(FSHD)1型重复。20 最常见的神经银河线上游戏网站疾病,如肌营养不良营销也是由于重复膨胀。这些遗传变化代表了使用NGS的潜在缺陷,并且可能占我们未确诊的肌病患者的比例,特别是如果临床医生没有怀疑这些疾病,因此没有订购正确的基因特异性测定。

其他复杂的遗传异常,如结构变体(插入/删除)和拷贝数变异(CNV)也被NGS检测到不足。17 为了检测这些变体,需要进行比较基因组杂交(CGH)微阵列作为辅助测试。 CGH微阵列也可以在怀疑具有隐性遗传的个体中进行,但仅发现一个致病性突变。14,21 最近,已经开发了几种用于NGS数据的CNV分析工具,并用于常规诊断。22,23

2.分析NGS生成的变体数据的挑战

ngs. 产生大量的变体数据,该数据需要与临床表型进行分析和相关性,以准确地解释其重要性。4,7,24 为变体分配致病性以及我们解释其功能和临床影响的能力也是一个挑战。24,25 此外,证明遗传变异是致病性的,可以是漫长而困难的过程。特别是,这适用于变体在非必要的接头位点或未与疾病相关联的畸形变异时。还可以存在许多“不确定意义”(VUS)的变种。即使生物信息学工具预测变种是良性的,任何罕见变体也有可能是致病性。功能性研究通常是优先考虑和跟进候选变体的关键。这些功能研究通常在研究活动下进行,而不是作为标准诊断实验室实践的一部分。疾病基因的异常剪接事件,例如,产生新的剪接位点或激活隐蔽的剪接位点的深层内肾内含量,越来越变得被认为是一种重要的疾病机制。 26-28 依赖于额外的调查,例如CGH阵列和RNA测序以检测NGS错过的变体正在成为提高我们诊断率的必要步骤。

3.可能错过NGS的其他疾病;线粒体和甲基化

通过靶向捕获和标准的全极端捕获试剂盒覆盖线粒体基因组的覆盖率差,以提供完整的线粒体DNA(MTDNA)基因组序列的准确变体数据,或可靠地检测低水平的异质性。29 已经开发了改进的外壳试剂盒,并且与WGS一起具有改善线粒体疾病的诊断。 WGS可以同时序列核DNA(NDNA)和MTDNA,并提供高水平的MTDNA覆盖率(>30,000读数),允许甚至低水平的异质MTDNA突变(<1%)检测和可靠地定量。 29 如果临床医生怀疑线粒体障碍,则应认为WGS应被视为优选的诊断测试。

DNA甲基化变化也没有由NGS拾取17 还需要进一步研究,以进一步了解这些变化是否可以是致病性和如何有效筛选它们。

考虑到NGS技术的局限性,拟议的诊断途径是调查疑似遗传性银河线上游戏网站疾病的患者所需的阶梯式过程。如前所述,初始患者评估和非侵入性调查仍然是必不可少的。30 我们提出以下诊断范式来调查患有遗传肌疾病的患者(图1)。我们的范式强调了准确的历史服用和准确表型的重要性。医生需要寻找关于患者患有银河线上游戏网站弱点的患者的线索,以指导他们朝向特定疾病。这些可能包括挛缩,皮肤变化,银河线上游戏网站弱点和/或浪费的模式和其他器官受累,(如心肌病)。

图1:提出了肢体肌营养不良和肌病的诊断算法。 CK =肌酸激酶,NCS =神经传导研究,EMG =电拍摄,MRI =磁共振成像,DMD = Duchenne肌营养不良,BM​​D = Becker的肌营养不良,MLPA =多重连接依赖性探针扩增,DM1 = Myotonic营养不良型1,DM2 =肌营养不良型2,FSOTONACAPULOHUMER肌营养不良,FGF-21 =成纤维细胞生长因子21,GDF15 =生长和分化因子15,WES =全外膜测序,WGS =全基因组测序,NGS =下一代测序,CGH =比较基因组杂交微阵列

一个详细的家庭和过去的病史可以提供关于遗传模式,其他器官的参与的线索,或者可能指向线粒体疾病的糖尿病或耳聋的存在。初步评估后,建议进行适当的筛查调查,包括CK水平,Pompe疾病的干血斑试验,甲状腺功能试验,神经生理学研究(神经传导研究[NCS]和肌电学)和下肢银河线上游戏网站MRI。在特定的临床环境中,可能需要其他血液测试,例如帮助排除自身免疫性银河线上游戏网站状况,或者如果历史朝向代谢肌病(例如空腹肉碱轮廓)。

下一步是排除常见的神经银河线上游戏网站障碍,这些疾病如FSHD型1,肌营养不良型1(DM1)和II型(DM2),脊柱银河线上游戏网站萎缩(在NCS上应该清楚的SMA)和Duchenne和Becker的肌营养不良症。对于疑似女性杜松植物或Becker的银河线上游戏网站营养不良,需要一种肌营养不良的MLPA。在怀疑线粒体疾病的情况下,临床医生可以考虑要求线粒体生物标志物对血清测试31 如FGF21或GDF15,和/或在进行WG之前筛选常见的线粒体疾病。

一旦排除常见的神经银河线上游戏网站障碍,那么请求NGS测试将被认为是适当的下一步和延迟侵入性研究,例如“难以诊断病例”的银河线上游戏网站活组织检查,并且尚未确定候选基因的银河线上游戏网站活组织检查。鉴于WES和WG的成本较低,通常是青睐。此外,对于NSE,除了VUS和附带的发现之外,还产生了较少的变体数据。32 在尽管诊断的情况下,尽管NSES,但是对于受影响的证据的WES推荐,优选地,父母(三重组)可以进一步辅助诊断过程。4,10 然而,Trio Exome可能是昂贵的并且建议与局部遗传服务的讨论。

尽管诊断仍然难以捉保,但尽管临床,临床医生可能会考虑在具有关于进一步诊断或研究测试的神经银河线上游戏网站中心或研究实验室的联络。可以考虑银河线上游戏网站活组织检查,或者是WGS,和/或RNA测序(RNA-SEQ),其需要获得银河线上游戏网站组织(作为优选组织)。

WGS越来越多地使用NSE或WES诊断。 WGS具有改善鉴定疾病拷贝数和结构性变化,重复扩展,非偏见调节和剪接变异以及线粒体基因组的更好覆盖率的额外优势。在儿科儿童疾病中,WGS对WES的增加诊断益处的证据一直在矛盾。33-35 使用WGS的主要挑战之一是基因组数据的变异解释中产生的大量基因组数据。在影响RNA表达的非编码变体或编码变化的验证中通常存在困难。32 以前的研究表明,RNA-SEQ对于对编码以及非编码变体的解释是有价值的,并且可以为全面或全基因组分析的患者提供大量的诊断率,而不是产生分子诊断。 RNA-SEQ具有检测可能推断致病性的已知基因的结构变体,例如诸如已知基因的倒置或易位。26,27,36 RNA-SEQ还被证明识别可能在WES和WG上错过的偏振和深入内部区域中的剪接改变变体,从而提高了我们的诊断率。37 在罕见的银河线上游戏网站疾病的两个群组中,来自银河线上游戏网站活检的RNA-SEQ分析达到35%和36%的病例的诊断。26,36 WGs与RNA-SEQ结合的应用可以通过改善我们解释变种的能力,进一步提高这些患者的诊断率26 并可能识别新的疾病基因。与神经肌病RNA-SEQ研究的一项重大挑战是作为诊断测试的有限可用性,因为目前它主要是在研究基础上获得的。

最后,重要的是要注意,在澳大利亚周围的所有实验室都没有认可,并且随着当地的遗传服务,研究实验室和神经银河线上游戏网站中心可以提供关于进一步测试或研究纳入的指导,如果可以在“困难”中可以提供指导诊断案例。“澳大利亚神经银河线上游戏网站网络(ANN)网站提供有关在北约认可的实验室中提供的神经银河线上游戏网站基因测试的信息,以及卫生专业人士的其他资源信息(//www.ann.org.au/ )。

结论和建议

鉴定银河线上游戏网站疾病的遗传基础是准确引导患者护理的最重要步骤。及时准确的诊断对于神经银河线上游戏网站疾病及其家庭的患者至关重要。它使我们能够为它们提供更好,更准确的预后信息,以及预测和预防和预防相关的并发症,例如心脏受累。我们还无法治愈这些家庭或治疗最遗传的肌病和营造,但我们可以防止家庭在进一步影响儿童时,他们能够进入预植入遗传测试。此外,临床试验的进入标准通常依赖于所知的基因型,特别是现在随着各种银河线上游戏网站疾病的基因疗法的出现。38-41

ngs. 技术进入临床实践已经转化了诊断途径,用简单的血液检查取代了多种和侵入性调查,并确保适当使用遗传测试,以允许早期的干预和个性化的医疗管理。 NGS在我们神经肌病诊断中的整合已经为全世界的神经银河线上游戏网站诊所掺入了新的,更少的侵入性和更具成本效益的诊断算法的方式。 NGS使更多的患者能够实现准确和及时的诊断,获得适当的疾病特异性治疗,并获得知情计划的计划。 DNA和RNA测序测序覆盖的持续改进可能进一步提高我们患者的诊断产量,并鉴定新的疾病基因。反过来,这可以导致疾病发病机制的见解和鉴定未来疗法的新目标的可能性,这可能对生活质量和提高患者的发病率和死亡率产生持久的影响。

参考

  1. Bushby K,Norwood F,施特劳V. 肢体肌营养不良:诊断策略。生物学习生物糖。 Acta 2007; 1772:238-242。 //doi.org/10.1016/j.bbadis.2006.09.009
  2. Gugliili M,Bushby K. 如何进行诊断和管理肢体肌营养不良。神经罗琳印度。 2008; 56:271-280。 DOI:10.4103 / 0028-3886.43445
  3. Chauveau C,Rowell J,Ferreiro A. 一个崛起的泰坦:TTN评论和突变更新。嗡嗡声。 2014; 35:1046-1059。 DOI:10.1002 / HUMU.22611
  4. Ghaoui R,Cooper St,Lek M,等。 使用全外exome测序进行肢体肌营养不良的诊断:结果和经验教训。贾马神经病学。 2015; 72:1424-1432。 DOI:10.1001 / Jamaneurol.2015.2274
  5. 莱克米,麦克阿瑟D. 神经银河线上游戏网站疾病背景下下一代测序的挑战。 J Neuroomuscul Dis。 2014; 1:135-149。 PMID:27858772
  6. Metzker ml。 测序技术– the next generation。 NAT Rev Genet。 2010; 11:31- 46.DOI:10.1038 / NRG2626
  7. O’Grady GL,LEK M,Lamande SR等。 先天性肌营养不良的诊断和病因:我们在那里。 Ann Neurol。 2016; 80:101-111。 DOI:10.1002 / ANA.24687
  8. Harris E,Topf A,Barresi R等人。 英国高度专业化的肢体腰带肌营养不良的exome序列与顺序基因测试相比。 orphanet j罕见dis。 2017; 12:151。
  9. Schofield D,Alam K,Douglas L等人。 大规模平行测序诊断儿科肌疾病的成本性能。 NPJ Genom Med。 2017; 2。
  10. 杨y,muzny dm,reidJ.G,Bainbridge Mn,Willis A. Ea。 临床全面测序术术疾病的诊断。 n Engl J Med。 2013; 369:1502-1511。DOI:10.1056 / NEJMOA1306555
  11. Ghaoui R,贝纳维德T,Lek M等。 Tor1aip1作为心力衰竭和隐性肢体肌营养不良的原因。神经紊乱。 2016; 26:500-503。 //doi.org/10.1016/j.nmd.2016.05.013
  12. Ghaoui R,Palmio J,Brewer J,et al。 HSPB8中的突变导致远端肌病和电机神经病变的新表型。神经学。 2016; 86:391-398。 //doi.org/10.1212/WNL.0000000000002324
  13. Cabrera-Serrano M,Ghaoui R,Ravenscroft G,et al。扩大GMPPB突变的表型。脑。 2015; 138:836-844。 DOI: 10.1093 /脑/ AWV013
  14. Savarese M,Di Fruscio G,Torella A等人。 未确诊的肌营养不良和肌病的遗传基础:504例患者的结果。神经学。 2016; 87:71-76。 DOI:10.1212 / WNL.0000000000002800
  15. HOISCHEN A.阵列富集后大规模平行的共济失调基因的蠕变。嗡嗡声。 2010; 31:494-499。 //doi.org/10.1002/humu.21221
  16. KU CS,Cooper DN,Polyphonakos C,Naidoo N,Wu M,Soong R. Exome Sequencing:双重角色作为发现和诊断工具。 Ann Neurol。 2012年; 71:5-14。 DOI:10.1002 / ANA.22647
  17. Biesecker Lg,绿色rc。 诊断临床基因组和外壳测序。 n Engl J Med。 2014; 370:2418-2425。 DOI:10.1056 / NEJMRA1312543
  18. 王W,Wei Z,Lam Tw,Wang J. 下一代测序在监管区域中具有较低的序列覆盖范围和较差的SNP检测能力。 SCI批准。2011; 1:55。
  19. Liquori Cl,Ricker K,Moseley Ml,等。银河线上游戏网站营养不良型2型ZNF9内含子1中的CCTG膨胀引起。科学。 2001; 293:864-867。 DOI: //doi.org/10.1126/science.1062125
  20. lemmers rj,o’Shea S,Padberg GW,Lunt PW,Van der Maarel SM。面部银河线上游戏网站营养不良症遗传诊断的最佳实践指南:2010年6月9日研讨会,LUMC,Leiden,荷兰。神经银河线上游戏网站疾病。 2012; 22:463-470。 DOI: //www.researchgate.net/deref/http%3A%2F%2Fdx.doi.org%2F10.1016%2Fj.nmd.2011.09.004
  21. Ankala A,Da Silva C,Gualandi F,等。神经银河线上游戏网站疾病的综合基因组方法具有高诊断产量。 Ann Neurol。 2015; 77:206-214。 DOI: //doi.org/10.1002/ana.24303
  22. Piroznia M,去FS,Zandi PP。 Wholegenome CNV分析:计算方法的进步。前群体。 2015; 6:138。 DOI: //doi.org/10.3389/fgene.2015.00138
  23. Tan R,Wang Y,Kleinstein Se,等。来自全外序列测序数据的拷贝数变型检测工具的评估。嗡嗡声。 2014; 35:899-907。
  24. Macarthur D,Manolio T,Dimmock D,Al。 e。研究人类疾病序列变异因果关系指南。自然。 2014; 508:469-476。
  25. Lek M,Konrad JK,Minikel Ev,Al。 e。 60,706人的蛋白质编码遗传变异分析。自然。 2016; 536:285-291。
  26. Cummings BB,Marshall JL,Tukiainen T,等。通过转录组测序改善孟德利亚病的遗传诊断。 sci翻译med。 2017; 9。
  27. Riley Lg,Waddell LB,Ghaoui R等人。没有Myofibrillar骨料的隐性Des Cardio /肌病:内部剪接变体沉默一位等位基因只留下了Missense L190P-Desmin。 EUR J HUM Genet。 2019; 27:1267-1273。
  28. 布莱恩SJ,Joshi H,Evelson FJ等。致病性异常剪接引起的抗磷酸体组装诱导生物物理空间约束的缺失。我是j嗡嗡声的遗传。 2019; 105:573-587。
  29. Falk MJ,Pierce EA,Consugar M等人。线粒体疾病遗传诊断:对所有丝科遗治核基因和线粒体基因组的全面分析。 Discov Med 2012; 14:389-399。
  30. Ghaoui R,Clarke N,Hollingworth P,Certham M.银河线上游戏网站疾病:最新的调查。实习生。 J 2013; 43:970-978.Doi: http://dx.doi.org/10.1111/imj.12234
  31. 戴维斯rl。,梁c,起诉厘米。目前血清生物标志物的比较作为线粒体疾病的诊断指标。神经学。 2016; 86:2010-2015。 DOI: //doi.org/10.1212/WNL.0000000000002705
  32. Efthymiou S,Manole A,Houlden H.神经银河线上游戏网站疾病中的下一代测序。 CurrOgin神经酚。 2016; 29:527- 536.Doi: //www.researchgate.net/deref/http%3A%2F%2Fdx.doi.org%2F10.1097%2FWCO.0000000000000374
  33. Eldomery MK,COBAN-AKDEMIR Z,Harel T,等。从未解决的临床外壳案例的额外研究分析中汲取了经验教训。 Genome Med。 2017; 9:26。 DOI: //doi.org/10.1186/s13073-017-0412-6
  34. Alfares A,Aloraini T,Subaie La,等。与全拓序列测序的再分析相比,全基因组测序提供额外但有限的临床效用。 Genet Med。 2018; 20:1328-1333。 DOI: //doi.org/10.1038/gim.2018.41
  35. 克拉克mm,stark z,farnaes l等。涉嫌遗传疾病儿童基因组和外壳测序和染色体微阵列的诊断和临床效用的核酸分析。 NPJ Genom Med。 2018; 3:16。
  36. Gonorazky HD,Naumenko S,Ramani Ak等。扩大RNA测序的边界作为罕见孟德尔疾病的诊断工具。我是j嗡嗡声的遗传。 2019; 104:1007。
  37. Kremer Ls,Bader DM,Mertes C等人。通过RNA测序的孟德利亚疾病的遗传诊断。 NAT Communce。 2017; 8:15824。
  38. Lowes LP,Alfano LN,Arnold WD等。年龄和运动功能的影响在婴幼儿1/2A的研究中,SMA型1接受单剂量基因替代疗法的研究。 Pediastreyurol。 2019; 98:39-45。 DOI: //doi.org/10.1016/j.pediatrneurol.2019.05.005
  39. al-zaidy sa,Mendell Jr。从临床实践到临床实践:SMA型基因替代疗法的实践考虑因素1. PediaTr Neurol 2019. Doi: //doi.org/10.1016/j.pediatrneurol.2019.06.007
  40. 段D.。银河线上游戏网站基因治疗:方法和方案。纽约,纽约:Humana,2011。
  41. 童人Mk,Joubert R,Poulard K,等。基因治疗延长鼠蝇肌瘤和犬肌病模型的存活率和恢复功能。 sci翻译med。 2014; 6:220ra210。 DOI: //dx.doi.org/10.1126%2Fscitranslmed.3007523
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